性能描述

生化活性：

肾上腺皮质分泌的原发性糖皮质激素。消炎效果是皮质酮的三倍，但 Na2+ 保留性能比皮质酮低。

溶液配制：

To prepare 50 μg/mL stock solution, add 1.0 mL absolute ethanol to 1.0 mg of product, gently swirl to dissolve, add 19 mL sterile medium.
Physical form

powder-RT; stock-frozen in working aliquots, avoid repeated freeze/thaw

相关论文：

氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响
【关键词】  细胞增殖
　　【Abstract】  AIM: To study the effects of hydrocortisone on the proliferation and collagen synthesis of skin fibroblasts in vitro and to explore the mechanism of steroid in the treatment of abnormal scars. METHODS:  Human scar fibroblasts were isolated and cultured from human skin by mechanical separation methods. After being stimulated by hydrocortisone with different concentration, the proliferation and collagen synthesis of human skin fibroblasts were determined by MTT methods and 3HProline incorporation respectively. RESULTS:  Hydrocortisone （0.1 g/L） inhibited the proliferation (MTT 0.523±0.051 vs 0.347±0.036, P<0.05) and collagen synthesis ［3HProline (248±6)  Bq vs (181±6) Bq, P<0.05］ of human skin fibroblasts in vitro in a concentration dependence manner (r=-0.8208). CONCLUSION:  Hydrocortisone may treat abnormal scars by inhibiting the proliferation and collagen synthesis of human skin fibroblasts.
　　【Keywords】 hydrocortisone; skin fibroblasts; proliferation; collagen; scars
　　【摘要】  目的：研究激素对体外培养的成纤维细胞增殖及分泌功能的影响，初步探讨其治疗瘢痕的作用机制. 方法：采用MTT比色法和3H脯氨酸掺入法，观察氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响. 结果：氢化可的松（0.1 g/L）能够抑制体外培养成纤维细胞增殖（MTT值0.523±0.051 vs 0.347±0.036, P<0.05）及分泌胶原的功能［3H脯氨酸掺入量(248±6) Bq vs (181±6) Bq, P<0.05］，并呈剂量依赖性（r=-0.8208）. 结论：氢化可的松可通过抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成，从而达到治疗瘢痕的作用.
　　【关键词】 氢化可的松；皮肤成纤维细胞；细胞增殖；胶原；瘢痕
　　0引言
　　激素在增生性瘢痕的治疗中已广泛应用，并取得了较好的治疗效果，但其作用机制尚未完全阐明［1］. 我们通过人皮肤成纤维细胞的体外培养，观察氢化可的松对细胞增殖及其胶原合成的影响，进一步探讨激素在增生性瘢痕治疗中的作用机制.
　　1材料和方法
　　1.1材料
　　DMEM高糖培养基及小牛血清（HyClone），胰蛋白酶（Gibco），四甲基偶氮唑盐（MTT）及离解蛋白DispaseⅡ(Sigma)，氢化可的松（华美公司），二甲基亚砜（DMSO，TBD公司），3H脯氨酸（北京原子能研究所）. 皮肤组织取自手术患者所取的全厚或中厚瘢痕皮肤，刮除皮下脂肪组织，尽快放入盛有DMEM培养液中备用.
　　1.2方法
　　将取下的标本切取5 mm×5 mm大小的小块置于含青霉素和链霉素各100 ku/L的DMEM溶液中，2 h后将组织标本浸于2.5 g/L dispase中，37℃条件下2~4 h后，表皮被完整的撕下，余下的真皮组织用PBS反复冲洗后，剪成1~2 cm的小块，加入30~50倍体积的1 g/LⅠ型胶原酶，37℃条件下继续消化3~5 h. 当成纤维细胞大部分从胶原纤维中分离出来时，用100目滤网过滤，以去除大的组织残渣. 滤液离心去上清液，细胞记数后接种于75 cm2培养瓶中，置37℃含50 mL/L CO2孵箱中培养，每3~4 d换液1次，待细胞融合后，进行细胞传代培养. 取第二代人皮肤成纤维细胞，以1×104/孔接种于96孔板，无血清培养孵育24~48 h，使细胞同步于休止期. 弃上清液，加入培养基和氢化可的松，分别进行成纤维细胞形态、数量及生物合成的检测. 氢化可的松浓度分别为0.05，0.1，0.2，0.3和0.5 g/L，设空白对照组. 倒置显微镜观察各组成纤维细胞形态与数量变化，同时，细胞用20 g/L戊二醛固定后进行扫描电镜观察. MTT比色法测定成纤维细胞增殖［2］:氢化可的松加入20 h后加入MTT 20 μL/孔，置37℃含50 mL/L  CO2孵箱中孵育4 h，再每孔滴加DMSO溶解缓冲液20 μL，在微型混合器上振荡15~20 min，置37℃孵育4 h，倒置显微镜下观察到针状染料结晶溶解，酶标仪波长570 nm处读取A值. 3H脯氨酸掺入法测定成纤维细胞胶原的合成［3］:氢化可的松加入12 h后弃上清100 μL，加入3H脯氨酸、VitC及β氨基丙混合液（终浓度皆为10 mg/L）100 μL，继续培养12h后吸弃上清，加入2.5 g/L胰蛋白酶200 μL消化细胞，多头细胞收集器收集细胞，液闪测定仪测定细胞3H脯氨酸掺入量（Bq）.
　　统计学处理: 所有结果均以x±s表示，应用SPLM统计软件行t检验和卡方检验.
2结果
　　2.1氢化可的松对皮肤成纤维细胞增殖的影响对照组细胞生长良好，多贴壁生长，呈梭形或星形，排列成束状或旋涡状（Fig 1A）. 氢化可的松处理组对皮肤成纤维细胞的增殖有抑制作用，当其浓度为0.1 g/L时，细胞增殖受到抑制，表现为细胞收缩变圆，数量明显减少，交织成网状（Fig 1B），当其浓度升至0.5 g/L时，细胞不能存活（Fig 1C）. 扫描电镜观察显示，对照组细胞呈梭形或椭圆形，微绒毛较多，可见足突和分裂相（Fig 2A）；而氢化可的松处理组细胞呈圆形，微绒毛明显减少，表面光滑，无足突，较少见分裂相（Fig 2B）. MTT比色分析显示，氢化可的松对皮肤成纤维细胞的增殖有明显的抑制作用（P<0.05），且其抑制作用呈明显的剂量依赖性（Tab 1）.
　　2.2氢化可的松对皮肤成纤维细胞胶原合成的影响3H脯氨酸掺入法测定成纤维细胞胶原的合成情况显示，氢化可的松可以抑制皮肤成纤维细胞3H脯氨酸的掺入，且其掺入量与氢化可的松的浓度呈负相关，相关系数r=-0.8208，P<0.05（Tab 1）.表1氢化可的松对体外培养皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响（略）
　　3讨论
　　皮肤异常瘢痕一般是皮肤创面持续过度修复的结果，这种持续过度修复的主要原因是：①成纤维细胞的过度增殖、活化及迁移；②成纤维细胞的生物合成增加，引起细胞外基质尤其是大量胶原的合成及沉积［4,5］. 临床实践表明，应用类固醇药物可以限制瘢痕的范围. 一般认为其效应途径主要是核结合模式：类固醇药物通过与细胞膜融合后进入靶细胞内，然后与细胞核受体结合形成二聚体，继而与DNA激素反应区域特异性地紧密结合，激活DNA转录，从而影响靶细胞功能［6］；同时，类固醇药物可与免疫系统多种基因的主要转录因子相结合，干扰mRNA的稳定性，抑制免疫活性物质的释放［7］. 本研究应用氢化可的松作用于体外培养的皮肤成纤维细胞，结果显示：氢化可的松对皮肤成纤维细胞的增殖有明显的抑制作用，同时，氢化可的松可以抑制皮肤成纤维细胞胶原的合成，且其抑制作用呈明显的剂量依赖性. 因此，可以推测：类固醇药物对皮肤瘢痕的影响，可能是抑制成纤维细胞增殖及胶原合成并促进细胞凋亡而实现的.
　　【参考文献】
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　　Wu YJ, Lu KH, Zhang LX. The influences of 17βEstradiol on collagen synthesis of hypertrophic scar fibroblasts［J］.Chin J Aesth Med, 2001;10(6):468-470.
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2.氢化可的松和胰岛素对兔软骨细胞生长的影响（查看全文）